識骨尋蹤 – DNA最終確認末代沙皇一家無人倖存
1918年7月17日凌晨，伴隨著葉卡捷琳堡地下室里的陣陣槍響。
俄羅斯末代沙皇尼古拉二世、皇后亞歷山德拉、他們的五個孩子，以及四名僕從，在這裏走向了生命的終點。
末代沙皇一家（1913年）
但是在之後近一個世紀里，始終有人不相信沙皇一家全部遇難
有人說，阿列克謝逃了出去；有人說，安娜斯塔西婭公主奇迹生還；
甚至後來有超過多人聲稱自己是「倖存的羅曼諾夫子女」。
其中最有名的，就是安娜·安德森。她聲稱自己是安娜斯塔西婭，並讓很多人相信了這個故事。
數十年後，隨著遺骸的出土，現代Dna技術破解了這個謎題
第一座墓穴：找到9具遺骸，卻少了兩個孩子
20世紀70年代末，地質學家亞歷山大·阿夫多寧在葉卡捷琳堡附近找到了一個墓穴，結合各種歷史資料，極大概率是末代沙皇一家的埋骨處。
但當時仍是蘇聯時期，他不敢公開這個發現。直到1991年蘇聯解體后，這處墓穴才被正式公布。
隨後挖掘工作正式啟動——考古人員從墓中挖出了9具遺骸。
根據歷史記錄，當年遇害的一共有11人：沙皇尼古拉二世、皇后亞歷山德拉、五個孩子，以及四名僕從。
可是墓里只有9具。
經過DNA檢測，科學家確認：這9具遺骸中包括沙皇、皇后，以及三位女兒和四位僕從。
但是皇太子阿列克謝和另一位公主不在其中。
早期的DNA檢測主要做了幾類比對。
第一，是常染色體STR ——通過常染色體STR技術成功將沙皇一家（沙皇夫婦和三位公主）和四位僕人區分開來。
第二，是通過母系遺傳的線粒體DNA, 也就是mtDNA
皇后亞歷山德拉方面：科學家用英國菲利普親王的DNA作為參考，因為他是皇后亞歷山德拉大姐維多利亞的外孫。
檢測結果顯示，皇后和三位女兒的遺骸，與菲利普親王的母系DNA關係吻合。
菲利普親王
而尼古拉二世方面：科學家找到了尼古拉的兩位母系親屬——
英國第三代法夫公爵詹姆斯：他是尼古拉大姨亞歷山德拉王后的曾外孫。
謝尼婭女伯爵：她是尼古拉二世大妹妹謝尼婭的外曾孫女。
然而變故陡生，這兩位親屬在在16169位點均為純合T
而尼古拉二世的線粒體DNA在16169位點存在異質性——簡單來說，就是同一個位置上同時出現了C和T兩種鹼基。
這在當時非常少見，也引發了巨大爭議。
面對這一爭議，俄羅斯人簡單粗暴，
他們打開了1899年去世的尼古拉二世的弟弟——格奧爾基大公的棺槨，取出他的樣本進行檢測
尼古拉兄弟倆和父母的合照
結果發現，兩兄弟在同一個位置都有這種特殊異質性；這成為確認沙皇身份的重要證據。
1998年，俄羅斯政府為挖出來的五具末代沙皇一家的骸骨，舉行了國葬。
參与第一次Dna檢測幾人之間的家族樹
第二座墓穴：70米外的兩具骸骨
2007年夏天，一群業餘考古愛好者在第一座墓穴附近約70米處，發現了新的骨骼碎片。
隨後，官方進行了正式發掘：這次發現的遺骸非常破碎，共有44塊骨骼和牙齒碎片。
人類學分析顯示，這些遺骸至少屬於兩個人：一個是大約15至19歲的女性；另一個很可能是12至15歲的男性。
這個年齡範圍，正好對應羅曼諾夫家族失蹤的兩個孩子：皇太子阿列克謝，以及另一位公主（可能是瑪麗亞或者安娜斯塔西婭）。
瑪麗亞和阿列克謝
但是，僅靠年齡和骨骼判斷還不夠，真正決定性的證據，仍然是DNA。
科學家對2007年第二墓穴中的遺骸進行了三類DNA檢測：線粒體DNA、常染色體STR、Y-STR。
第二墓穴中的兩具遺骸，線粒體DNA與皇后亞歷山德拉及第一墓穴中的三位公主完全吻合。這說明他們來自同一個母系家族。
常染色體STR可以用來判斷親子關係和兄弟姐妹關係：檢測結果顯示，第二墓穴中的男性樣本和女性樣本，是兄弟姐妹的可能性比毫無關係高出560萬倍。
更重要的是，他們的DNA完全符合尼古拉二世和亞歷山德拉作為父母時的遺傳規律。
統計結果顯示：女性樣本是沙皇夫婦女兒的可能性，為4.36萬億倍；男性樣本是沙皇夫婦兒子的可能性，超過80萬億倍。
這個男性樣本，幾乎可以確認就是皇太子阿列克謝。
而Y-STR只通過父系男性傳遞。因此科學家檢測了三個人的Y染色體：2007年發現的墓穴中的男性遺骸；尼古拉二世的牙齒；
一位現存羅曼諾夫男性後裔：尼古拉二世的侄子安德烈
結果顯示，三人的17個Y-STR位點完全一致；這意味著第二墓穴中的男孩，確實來自羅曼諾夫父系血脈。
Y染色體家族樹
2015年：再次開棺驗屍
即使已經多方驗證，1991年墓穴里確實出土了尼古拉二世的遺骸，
但是俄羅斯東正教會仍對遺骸的真實性感到質疑。
2015年11月，俄羅斯政府再次打開了了尼古拉二世和妻子亞歷山德拉皇后的墳墓。重新提取了夫婦二人的DNA。
結果證明：沙皇下頸椎骨和下頜骨的碎片與尼古拉二世被刺殺的祖父亞歷山大二世衣服上的血跡相吻合。
沙皇亞歷山大二世
而亞歷山德拉的線粒體也和一位不願意透露姓名的維多利亞女王後代的信息相吻合。
在末代沙皇死後的數十年間年裡，無數傳言、冒名者和陰謀論不斷出現；沙皇的母親至死都不願意相信兒子被殺，然而DNA證明了這一切——
1918年7月17日凌晨，俄羅斯末代沙皇一家，無一倖存。
俄羅斯可能也曾打開尼古拉二世之父亞歷山大三世的棺槨與尼古拉二世進行Dna檢測。
四位女大公中，由於年齡接近，瑪麗亞和安娜斯塔西亞的骸骨始終無法被準確區分。
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